生态学杂志 ›› 2005, Vol. ›› Issue (8): 921-924.
焦晓丹1, 吴凤芝1, 高海军2
JIAO Xiaodan1, WU Fengzhi1, GAO Haijun2
摘要: 采用正交实验设计,对影响土壤微生物RAPD扩增体系的Mg2+、dNTP浓度及引物浓度进行了研究,同时对退火温度、延伸时间及循环次数进行摸索。结果表明,适宜土壤微生物PCR扩增反应在25μl体积中进行,包括7ng土壤微生物DNA样品、20pm随机引物、1.5uTaq酶、3.0mmol.L-1Mg-CL2和0.2mmol·L-1dNTP。PCR扩增反应进程如下:94℃3min,使土壤DNA变性;然后再进行39个循环,每个循环包括94℃1min,37℃40s,72℃90s,结束后72℃延伸7min。
中图分类号: